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江西PCR实验室装修工程建立前PCR区
PCR实验室可以是分散形式也可以是组合形式。完成一组PCR实验通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程若实验工艺需要还应增加样品粉碎过程。
一、分散形式PCR实验室
所谓分散形式PCR实验室是指完成上述实验过程的实验用房彼此相距较远呈分散布置形式。对于这种布置形式的PCR实验室由于各个实验之间不易
相互干扰因此无需特殊条件要求。
二、组合形式PCR实验室
所谓组合形式PCR实验室, 是指完成PCR四个实验过程的实验用房相邻布置组成独立实验区域的形式。对于组合形式PCR实验室由于各个实验间集中布置容易造成相互干扰因此对总体布局以及屏障系统具有一定的要求。各室在入口处设缓冲间以减少室内外空气交换。试剂配制室及样品处理室宜呈微正压以防外界含核酸气溶胶的空气进入造成污染核酸扩增室及产物分析室应呈微负压以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品。如果使用荧光PCR仪扩增室和产物分析室可以合并。
该去专门用于准备各种反应,这个区域必须保持干净,而且没有来自克隆和样品准备的污染。前PCR区必须要有试剂和准备,特别是专门用于前PCR区的正压活塞式移液管。
⑴可以把即刻可用的“主混合物”溶液配好、分装并保存在-20℃或4℃,在实验室只涉及到扩增一种或少数几种特异序列时这样做很有用。
⑵如果你的实验室使用多套引物,以致于配制包括所有试剂的单一反应混合物不够经济,可以考虑分装保存够一天的PCR成分。
⑶作为一个规则,应该保存一套阴性、弱阳性和强阳性对照样品来分析样品配制和PCR前过程的效率和洁净程度。而且,你也希望通过使用一个已知的弱阳性样品来验证你的样品缓冲液以证明里面不含扩增抑制物。
⑷阴性样品要与每组样品同时做,以分析是否存在样品与样品之间的污染以及是否存在PCR产物的污染,阴性对照应该包括核酸以外的所有试剂。
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