要控制实验室的无菌环境,可以遵循以下步骤和要点,以确保实验环境的无菌性和实验结果的准确性:
一、无菌室的设计与管理
无菌室的要求:
无菌室应矮小、平整,高2.2~2.3米,内部装修应平整、光滑,无凹凸不平或棱角等,便于擦洗及杀菌。
无菌室周围需设缓冲走廊,走廊旁再设缓冲间,其面积可小于无菌室。
无菌室、缓冲走廊及缓冲间均设有日光灯及供消毒空气用紫外灯,杀菌紫外灯离工作台以1米为宜,其电源开关均应设在室外。
无菌室与缓冲间进出口应设拉门,门与窗平齐,门缝要封紧,两门应错开,以免空气对流造成污染。
建立管理制度:
制定并遵守无菌室管理制度,确保所有进入无菌室的人员都了解并遵循相关规定。
二、无菌室的洁净度要求
环境洁净度:
无菌操作间应满足相应洁净级别的操作环境,环境应符合万级洁净度要求。具体标准为每立方米直径大于等于0.5微米的尘埃粒子数应小于等于350000个,30分钟尘降菌落数小于等于3cfu/立方米。
无菌室的空间洁净度应达到10000级,但操作区域如超净工作台、生物安全柜里需要达到洁净度100级。
定期检测:
对于无菌室的洁净度,应定期进行检测,以确保其始终满足实验要求。
三、无菌实验流程
实验前准备:
对实验台、手、检验用具进行消毒,确保无菌环境和无菌实验用品。
防护衣服、口罩、手套等必须佩带,以减少微生物污染的风险。
实验操作:
在进行接种或向培养皿内倒培养基时,试管口或瓶壁外面不要接触皿底,试管或瓶口应倾斜一下在火焰上通过,以减少污染的风险。
四、物品消毒
物品消毒:
所有进入无菌环境的物品都必须经过严格的消毒处理,包括实验用具、培养基、检验样品等。
五、其他措施
空气流通:
无菌室内应保持良好的空气流通,避免空气死角,减少微生物滋生的机会。
紫外线照射:
定期使用紫外线灯对无菌室进行照射消毒,以杀灭空气中的微生物。
使用无菌技术:
在实验操作过程中,应使用无菌技术,如无菌称样、无菌接种等,以防止微生物的污染。
定期清洁与消毒:
定期对无菌室进行清洁和消毒,包括地面、墙面、天花板、设备表面等,以保持其无菌状态。
通过遵循以上步骤和要点,可以有效地控制实验室的无菌环境,确保实验的准确性和可靠性。